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加快打造原始創(chuàng)新策源地，加快突破關(guān)鍵核心技術(shù)，努力搶占科技制高點(diǎn)，為把我國(guó)建設(shè)成為世界科技強(qiáng)國(guó)作出新的更大的貢獻(xiàn)。

——習(xí)近平總書(shū)記在致中國(guó)科學(xué)院建院70周年賀信中作出的“兩加快一努力”重要指示要求

面向世界科技前沿、面向經(jīng)濟(jì)主戰(zhàn)場(chǎng)、面向國(guó)家重大需求、面向人民生命健康，率先實(shí)現(xiàn)科學(xué)技術(shù)跨越發(fā)展，率先建成國(guó)家創(chuàng)新人才高地，率先建成國(guó)家高水平科技智庫(kù)，率先建設(shè)國(guó)際一流科研機(jī)構(gòu)。

——中國(guó)科學(xué)院辦院方針

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【中國(guó)科學(xué)報(bào)】科學(xué)家首次獲得基因敲入的食蟹猴

2018-01-15 中國(guó)科學(xué)報(bào) 黃辛

【字體：大中小】

語(yǔ)音播報(bào)

獲得基因敲入的食蟹猴。中科院神經(jīng)所供圖

　　中科院神經(jīng)科學(xué)研究所、腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心、神經(jīng)科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室楊輝研究組與蘇州非人靈長(zhǎng)類(lèi)研究平臺(tái)孫強(qiáng)團(tuán)隊(duì)合作，利用了一種以同源臂介導(dǎo)的末端接合（HMEJ）為基礎(chǔ)的基因敲入策略，在世界上首次獲得了基因敲入的食蟹猴。近日，該成果在線(xiàn)發(fā)表于《細(xì)胞研究》。

　　基因修飾猴模型可以用于模擬人類(lèi)疾病癥狀，因此可以作為研究人類(lèi)疾病機(jī)制和推進(jìn)臨床治療的工具。然而，由于種種原因例如效率低，此前還沒(méi)有基因成功敲入猴的報(bào)道。

　　基于實(shí)驗(yàn)室之前的研究，同源臂介導(dǎo)的末端接合（HMEJ）的方法可以有效地在獼猴胚胎上實(shí)現(xiàn)高效的靶向基因整合。研究人員進(jìn)一步優(yōu)化受精卵注入條件，包括供體質(zhì)粒濃度以及注射劑量，期望在提高敲入效率的同時(shí)保持正常的胚胎發(fā)育，進(jìn)而獲得基因敲入的猴子。

　　具體來(lái)說(shuō)，研究人員在Actb位點(diǎn)插入p2A-mCherry以實(shí)現(xiàn)mCherry在Actb啟動(dòng)子的控制下表達(dá)。在經(jīng)歷完整的懷孕周期后，研究人員成功地獲得了一對(duì)雙胞胎猴和三只單胎的雌性猴。通過(guò)直接表皮熒光觀察兩只新生猴的腳趾發(fā)現(xiàn)，與野生型相比，它們展現(xiàn)出mCherry熒光。對(duì)兩只死亡雌猴的各個(gè)組織進(jìn)行切片觀察，發(fā)現(xiàn)尾巴、腳趾、心臟、肌肉、心臟、腎、大腦和卵巢均顯示出不同嵌合程度的mCherry表達(dá)。值得注意的是，研究人員在卵巢的大部分區(qū)域都檢測(cè)到mCherry的表達(dá)，說(shuō)明基因敲入猴子具有生殖系傳遞的可能性。

　　專(zhuān)家表示，基于其強(qiáng)大的DNA敲入效率和高保真性，HMEJ介導(dǎo)的敲入策略為構(gòu)建靶向基因修飾的猴模型提供了可能性。

　?。ㄔd于《中國(guó)科學(xué)報(bào)》 2018-01-15 第1版要聞)

獲得基因敲入的食蟹猴。中科院神經(jīng)所供圖
　　中科院神經(jīng)科學(xué)研究所、腦科學(xué)與智能技術(shù)卓越創(chuàng)新中心、神經(jīng)科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室楊輝研究組與蘇州非人靈長(zhǎng)類(lèi)研究平臺(tái)孫強(qiáng)團(tuán)隊(duì)合作，利用了一種以同源臂介導(dǎo)的末端接合（HMEJ）為基礎(chǔ)的基因敲入策略，在世界上首次獲得了基因敲入的食蟹猴。近日，該成果在線(xiàn)發(fā)表于《細(xì)胞研究》。
　　基因修飾猴模型可以用于模擬人類(lèi)疾病癥狀，因此可以作為研究人類(lèi)疾病機(jī)制和推進(jìn)臨床治療的工具。然而，由于種種原因例如效率低，此前還沒(méi)有基因成功敲入猴的報(bào)道。
　　基于實(shí)驗(yàn)室之前的研究，同源臂介導(dǎo)的末端接合（HMEJ）的方法可以有效地在獼猴胚胎上實(shí)現(xiàn)高效的靶向基因整合。研究人員進(jìn)一步優(yōu)化受精卵注入條件，包括供體質(zhì)粒濃度以及注射劑量，期望在提高敲入效率的同時(shí)保持正常的胚胎發(fā)育，進(jìn)而獲得基因敲入的猴子。
　　具體來(lái)說(shuō)，研究人員在Actb位點(diǎn)插入p2A-mCherry以實(shí)現(xiàn)mCherry在Actb啟動(dòng)子的控制下表達(dá)。在經(jīng)歷完整的懷孕周期后，研究人員成功地獲得了一對(duì)雙胞胎猴和三只單胎的雌性猴。通過(guò)直接表皮熒光觀察兩只新生猴的腳趾發(fā)現(xiàn)，與野生型相比，它們展現(xiàn)出mCherry熒光。對(duì)兩只死亡雌猴的各個(gè)組織進(jìn)行切片觀察，發(fā)現(xiàn)尾巴、腳趾、心臟、肌肉、心臟、腎、大腦和卵巢均顯示出不同嵌合程度的mCherry表達(dá)。值得注意的是，研究人員在卵巢的大部分區(qū)域都檢測(cè)到mCherry的表達(dá)，說(shuō)明基因敲入猴子具有生殖系傳遞的可能性。
　　專(zhuān)家表示，基于其強(qiáng)大的DNA敲入效率和高保真性，HMEJ介導(dǎo)的敲入策略為構(gòu)建靶向基因修飾的猴模型提供了可能性。
　　（原載于《中國(guó)科學(xué)報(bào)》 2018-01-15 第1版要聞)

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